Антивитамины. Методы исследования обеспеченности организма витаминами

Классификация антивитаминов

• Конкурентные (структуроподобные). Они похожи на витамин и вытесняют его из АЦ фермента, действуя как конкурентные ингибиторы (пиритиамин, окситиамин (антивитамины В1), аминоптерин, метотрексат (антивитамины фолиевой к-ты), изониазид (антивитамин РР).

• Неконкурентные (неструктуроподобные). Они не похожи на витамины, и либо разрушают его, действуя как фермент, (тиаминаза на В1, аскорбиназа на С), либо образуют с витамином нерастворимый комплекс, препятствуя его всасыванию в ЖКТ (авидин связывает витамин Н). Многие антивитамины применяют в медицинской практике.

Методы исследования обеспеченности организма витаминами

Для обнаружения витаминов и определения их количества в различных веществах и биологических жидкостях существуют реакции, основанные на цветных реакциях, характерных для той или иной группировки, входящей в витамин.

Качественные реакции на витамин В1.

Витамин В1 состоит из пиримидинового и тиазолового колец. Витамин В1 получил название тиамина поскольку содержит серу и азот.

• Реакция окисления. Принцип метода. В щелочной среде тиамин окисляется в тиохром феррицианидом калия. Тиохром обладает синей флюоресценцией при ультрафиолетовом облучении раствора на флюороскопе.

• Диазореакция. Принцип метода. В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует сложное комплексное соединение оранжевого цвета.

Качественная реакция на витамин В2.

Принцип метода. Окисленная форма витамина В2 представляет собой желтое флюоресцирующее в ультрафиолетовых лучах вещество. Реакция на витамин В2 основана на его способности легко восстанавливаться. При этом раствор витамина В2, обладающий желтой окраской, приобретает сначала розовый цвет за счет образования промежуточных соединений, а затем обесцвечивается, т. к. восстановленная форма витамина В2 бесцветна.

Качественная реакция на витамин РР.

Принцип метода. Витамин РР при нагревании с раствором ацетата меди образует плохо растворимый синий осадок медной соли никотиновой кислоты.

Качественная реакция на витамин В6.

Принцип метода. Витамин В6 при взаимодействии с раствором хлорного железа образует комплексную соль типа фенолята железа красного цвета.

Качественная реакция на витамин В12.

В12 — единственный витамин, содержащий в своей структуре металл (кобальт). Принцип метода. При взаимодействии ионов кобальта с тиомочевиной при нагревании образуется роданид кобальта зеленого цвета.

Количественное определение витамина С.

Принцип метода. Метод основан на способности витамина С восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол, который в кислой среде имеет красную окраску, а при восстановлении обесцвечивается; в щелочной среде окраска синяя. Для предохранения витамина С от разрушения исследуемый раствор титруют в кислой среде щелочным раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолом до появления розового окрашивания.

Определение содержания витамина С в моче.

Определение содержания витамина С в моче дает представление о запасах этого витамина в организме, так как имеется соответствие между концентрацией витамина в крови и количеством этого витамина, выделяемым с мочой.

В стаканчик или колбочку отмеривают 10 мл мочи и 10 мл дистиллированной воды, перемешивают, подкисляют 20 каплями 10 %-ного раствора хлористоводородной кислоты и титруют 0,001 н раствором 2,6- дихлорфенолиндофенола до розовой окраски. Для расчета содержания аскорбиновой кислоты в моче используют формулу:

где х — содержание аскорбиновой кислоты в мг/сут; 0,088 — количество, А — результат титрования 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола (мл); Б — объем мочи, взятый для титрования (мл); В — среднее суточное количество мочи (для мужчин 1500 мл, для женщин 1200 мл).