Диагностика острого герпетического стоматита (ОГС) у детей

Клиническая диагностика

В большинстве случаев для диагностики ОГС достаточно анамнеза и клинических данных.

Изменения в полости рта при ОГС у детей следует дифференцировать с:

• изменения, связанные с прорезыванием временных зубов;

• острая и хроническая механическая травма СОПР и красной каймы губ; • ветряная оспа;

• герпангина;

• инфекционный мононуклеоз;

• афтозный стоматит;

• тяжелое течение псевдомембранозного кандидозного стоматита;

• химиотерапевтический и лучевой мукозит;

• первичный и вторичный сифилис;

• милиарный туберкулез;

• пузырчатка;

• болезнь Крона.

Лабораторная диагностика

Можно использовать дополнительные методы, основанные на:

• подтверждении присутствия в организме вирионов или их компонентов (ДНК, антигенных структур);

• обнаружении ВПГ-индуцированных изменений в эпителиоцитах;

• регистрации иммунных реакций организма на герпетическую инфекцию (продукции специфических антител).

Детекция ДНК ВПГ с применением полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Роль золотого стандарта перешла к молекулярно-биологическому методу определения в биоматериале фрагментов ДНК вирусов с помощью ПЦР в острой фазе первичной инфекции или ее рецидива.

ПЦР-анализ позволяет выявить либо исключить наличие в исследуемом материале типа вируса герпеса, указанного в запросе врача. Количе- ственный ПЦР-анализ с детекцией результатов в режиме «реального времени» направлен на определение уровня вирусной нагрузки. Методика выполнения ПЦР-анализов позволяет проводить в одном образце материала пациента одновременную детекцию ДНК различных типов герпесвирусов и даже бактерий.

Для исследования пригодны биоматериалы, взятые из зоны поражения, а также кровь и другие биожидкости. Уровень чувствительности метода достигает 90 %, однако зависит от времени и условий забора материала: наиболее высокие результаты получают при изучении образцов, полученных в первые несколько суток от появления элемента поражения вне противовирусной терапии (до начала или спустя 2 недели после нее).

Автоматизированный ПЦР-анализ проводится в лаборатории в течение 4–5 часов. Результат качественного ПЦР-анализа оформляется как «+» или «-», количественного — как «N копий ДНК ВПГ/105 клеток эпителия».

Метод обнаружения антигенов ВПГ при помощи прямой иммунофлюоресценции

Метод обнаружения антигенов ВПГ при помощи прямой иммунофлюоресценции основан на явлении флюоресценции, возникающей при связывании антигена ВПГ, присутствующим в материале, с реагентом — меченым флюорохромом антителом к ВПГ.

Результат регистрируют с помощью флюоресцентной микроскопии.

Рекомендации по выбору материала, сроками и технике его забора совпадают с таковыми для ПЦР. Забор материала лучше поручить лаборатории. Материал, забранный в клинике, распределяют тонким слоем на предметном стекле, фиксируют в чистом ацетоне в течение 10 минут, высушивают на воздухе и передают в лабораторию для проведения иммуногистохимической реакции.

Исследование занимает меньше часа. Результат оформляют как «+» или «-».

Выявление антител IgM и IgG к ВПГ при помощи иммуноферментного анализа (ИФА)

Выявление антител IgM и IgG к ВПГ при помощи иммуноферментного анализа (ИФА) — наиболее совершенный доступный метод для выявления антител (качественный ИФА) и оценки их концентрации (количественный ИФА). Метод основан на реакции между антителами к ВПГ, содержащимися в сыворотке крови пациента, и специфическими антигенами диагностикума. ИФА полезен для дифференциации острой и хронической инфекции, может быть использован для выявления хронической герпетической инфекции вне рецидивов с явными клиническими проявлениями.

Кровь для исследования забирают в лаборатории. Количественный ответ получают, определяя титр антител. Автоматизированное исследование завершается в течение часа. Результат представляют как индекс позитивности (менее 0,8 — отрицательный, 0,8–1,1 — сомнительный, более 1,1 — положительный); при сомнительном результате предлагают повторить исследование спустя 5–7 дней (для IgM) или 10–14 дней (для IgG).