Биологический (экспериментальный) метод исследования: определение, цели, этапы, оценка

Биологический метод исследования: определение, цели, оценка

Цели биологического метода:

1. выделение и идентификация чистой культуры микроорганизмов, если её невозможно получить на питательных средах:

   • из-за большого количества в материале посторонней микрофлоры;

   • для выделения микроорганизмов, которые на питательных средах не растут (риккетсии, вирусы);

2. определение степени вирулентности и патогенности микроорганизмов;

3. индикация и идентификация экзотоксинов;

4. изучение патогенеза инфекционных болезней;

5. производство биологических препаратов (профилактических, диагностических и лечебных сывороток, вакцин, культур тканей);

6. проверка безвредности и эффективности лечебных препаратов.

Биологический метод исследования: этапы

1. Забор и обработка материала – без особенностей; материал должен использоваться для заражения как можно быстрее.

2. Выбор и заражение лабораторного животного:

   • выбор животного:

     • обуславливается целями исследования, но главным образом – чувствительностью вида к данной инфекции;

     • наиболее часто используются белые мыши (4/6), белые крысы (1/6), морские свинки и кролики;

     • помимо нелинейных животных, постоянно разводимых в лабораториях, могут использоваться линейные животные определенных линий, которые являются генетически однородными, проявляют одинаковые реакции на патогенные факторы, а также обладают повышенной или пониженной чувствительностью к определенным возбудителям или опухолевым заболеваниям;

   • заражение животного:

     • проводится с соблюдением правил асептики и, если вмешательство болезненное, с анестезией;

     • накожный метод – нанесение материала на царапину от скарификационной иглы;

     • внутрикожный метод – введение под кожу тонкой иглой под острым углом с образованием вздутия в виде «лимонной корочки»;

     • подкожный метод – введение в основание кожной складки;

     • внутримышечный метод – введение в верхнюю треть задней лапы животного;

     • внутривенный метод – введение в краевую вену уха кроликов, яремную вену морских свинок, хвостовую вену крыс или мышей;

     • пероральный метод – введение с помощью зонда;

     • интраназальный метод – введение нос после наркотизирования животного;

     • внутрибрюшинный метод – введение притупленной иглой через брюшную стенку;

     • внутримозговой метод – введение интракраниально, используется для возбудителей, тропных к нервной ткани.

3. Прижизненное наблюдение, умерщвление животного и вскрытие трупа:

   • прижизненное наблюдение:

     • учитывается появление характерной симптоматики, инфильтратов, гибель животного;

     • у животного забирают материал для бактериологического и серологического исследования, ставят аллергические пробы;

   • умерщвление животного и вскрытие трупа:

     • животных, которые при эксперименте существенно утратили жизнеспособность или находятся в агонии, умерщвляют гуманным методом;

     • при вскрытии изучают патоморфологическую картину, делают посев гомогенизированных органов, из внутренних органов готовят мазки-отпечатки;

     • для посева также забирают кровь, обнаруженный экссудат и гной;

     • после вскрытия труп животного сжигают или кипятят в растворе фенола.

4. Идентификация выделенной культуры (при необходимости) и выдача заключения.