Реакция пассивной (непрямой) и обратной пассивной гемагглютинации. Реакция латексагглютинации. Реакция коагглютинации

Реакция пассивной и обратной пассивной гемагглютинации

Реакция пассивной (непрямой) агглютинации (РПГА или РНГА) и реакция обратной пассивной (непрямой) агглютинации (РОПГА или РОНГА) относятся к простым, поскольку включают только два компонента: АГ и АТ, один из которых искусственно адсорбирован на поверхности эритроцитов (поэтому они и называются непрямыми или пассивными). Такие эритроциты называются сенсибилизированными.

В РНГА используется антигенный эритроцитарный диагностикум, то есть эритроциты с сорбированными на их поверхности антигенами. Соответственно, назначение этой реакции – поиск антител. Если антитела в сыворотке присутствуют, они несколькими своими активными центрами будут взаимодействовать с разными эритроцитами, что приведет к образованию «решетки».

Реакцию ставят в специальных лунках, в которые добавляют несколько разведений сыворотки крови в физрастворе и диагностикум. После инкубации (желательно в течение 2 ч при температуре ~37 °С) проводят оценку: положительной считается реакция, при которой эритроциты оседают на дно лунки равномерно покрывают его в виде перевернутого «зонтика» с неровными краями. При отрицательной реакции эритроциты также оседают, но покрывают дно в виде маленькой «пуговки» (диска) с ровными краями.

РНГА является высокочувствительной и высокоспецифичной, но в то же время достаточно простой в исполнении и недорогой реакцией. Она широко применяется для диагностики инфекционных болезней, установления беременности, выявления повышенной чувствительности к лекарствам.

РОНГА отличается от прямой реакции тем, в ней используется антительный эритроцитарный диагностикум, то есть эритроциты с сорбированными на их поверхности антителами. Соответственно, назначение этой реакции – поиск антигенов. Механизм этой реакции такой же, только «узлами» решетки становятся не антитела, а антигены. Проводится она аналогично РНГА.

Наиболее часто РОНГА применяют для поиска в крови токсинов – дифтерийного или ботулинического – но ее также можно использовать и для обнаружения антигенов непосредственно в материале при условии их высокой концентрации.

Реакции латексагглютинации и коагглютинации

Реакция латексагглютинации по своему механизму очень похожа на РНГА или РОНГА за тем исключением, что диагностические антитела или антигены сорбируются не на эритроцитах, а на частицах латекса. Эту реакцию прежде всего отличает большая скорость образования видимых агрегатов, что позволяет учитывать ее уже через 10-15 минут, при сохранении высокой чувствительности и специфичности.

Наиболее часто реакция применяется для экспресс-диагностики антигенов стрептококков, гемофильной палочки, менингококков в различных тканевых жидкостях (моче, сыворотки крови, спинномозговой жидкости), стрептококков и стафилококков в мазках из зева.

Реакция коагглютинации основана на способности белка А золотистого стафилококка связывать Fc-фрагменты иммуноглобулинов, что позволяет использовать их как носитель антител. Для проведения реакции на предметное стекло наносят взвесь сенсибилизированных известным антителом стафилококков и добавляют к ним взвесь исследуемых микробов либо материала с высокой концентрацией антигена.

Механизм реакции такой же, как и у РОНГА, только носителями антител выступают не эритроциты, а стафилококки. Преимуществом реакция является высокая скорость: учет можно производить уже по прошествии минуты.