... > Микробиология > Серологический метод исследования....

Серологический метод исследования. Общие закономерности серологических реакций. Использование серологических реакций для определения неинфекционных маркёров

НАВИГАЦИЯ ПО СТРАНИЦЕ

Серологический метод исследования: определение, задачи, материалы, оценка Основные понятия. Общие закономерности серологических реакций Серологические реакции для определения неинфекционных маркёров
ПОЛНЫЙ ОТВЕТ
БЕЗ ВОДЫ
Без воды — краткий вариант ответа,
легко понять и запомнить

Серологический метод исследования: определение, задачи, материалы, оценка

Серологический метод исследования – это метод, в основе которого лежит реакция специфического взаимодействия антигенов (АГ) и антител (АТ). Для проведения исследования требуются либо известные антигены (поиск антител), либо известные антитела (поиск антигенов).

Задачи серологического метода:

  • диагностика инфекционных заболеваний по обнаружению антител:

    • обнаружение АТ в диагностическом титре;

    • оценка динамики титра АТ;

    • определение антител различных классов (IgG, IgM);

  • диагностика аутоиммунных и аллергических заболеваний по обнаружению антител;

  • диагностика инфекционных заболеваний (чаще при помощи РИФ или ИФА) и некоторых опухолей по обнаружению антигенов;

  • определение активности поствакцинального иммунитета;

  • определение групп крови и подбор доноров при пересадке органов;

  • определение титров приготовленных (диагностических, лечебных) сывороток.

Материалы для серологического исследования:

  1. сыворотка крови, желательно венозной, взятой утром натощак;

  2. чистые культуры микроорганизмов;

  3. патологический материал от больных (соскобы, пунктаты, биоптаты, секционный материал) для экпресс-обнаружения антигенов.

Достоинства метода

Недостатки метода

  • высокая чувствительность;

  • высокая специфичность;

  • ранний метод при выявлении антигенов;

  • быстрота

  • поздний метод при выявлении антител;

  • частые ложноположительные и ложноотрицательные результаты;

  • опасность инфицирования

Основные понятия. Общие закономерности серологических реакций

Диагностическая сыворотка (известное АТ) – иммунная сыворотка, содержащая АТ известной специфичности в известном титре. Диагностические сыворотки получают путём иммунизации животных соответствующим АГ либо при помощи гибридомной технологии (моноклональные антитела).

Диагностикум (известный АГ) – взвесь известных микроорганизмов или извлечённых из них АГ в физрастворе.

Титр сыворотки – максимальное разведение сыворотки (или минимальное её количество), в котором обнаруживаются АТ.

Диагностический титр – разведение сыворотки, в котором реакция положительна только у больных и отрицательна у здоровых.

Парные сыворотки – две сыворотки одного обследуемого, взятые с определённым интервалом для изучения динамики титра АТ. Первую сыворотку берут немедленно, вторую – через 7–14 дней (острые инфекции) или через месяц (хроническая инфекция). Диагностическим считается нарастание титра антител в четыре и более раза.

Серонегативный период – стадия заболевания, в которой специфические АТ ещё не обнаруживаются, несмотря на наличие возбудителя («серологическое окно»).

Серопозитивный период – стадия заболевания, в которой специфические АТ обнаруживаются.

Сероконверсия – переход серонегативности в серопозитивность.

Общие закономерности серологических реакций:

  1. Ставятся in vitro (за исключением некоторых реакций, включаемых также в аллергологический метод, например реакции кожной анафилаксии).

  2. Проявляются при определенных условиях:

    • иммунологическое соответствие (гомологичность) АГ и АТ;

    • присутствие их в эквивалентных соотношениях (недостаток или избыток компонентов препятствует образованию иммунных комплексов);

    • в оптимальных температурных условиях (0–37 oС) и рН среды;

    • в присутствии электролита (0,85%-ный раствор NaCl).

  3. Все серологические реакции отличаются по проявлениям (регистрируемому эффекту) и технике постановки.

  4. Различают однофазные и двухфазные серологические реакции. Однофазные реакции имеют только специфическую фазу (например, реакция иммунофлюоресценции).

Двухфазные реакции завершаются неспецифической фазой, в которой происходят видимые изменения (например, реакция агглютинации или реакция преципитации).

Серологические реакции для определения неинфекционных маркёров

Для определения антител неинфекционной природы, которые чаще всего исследуют для выявления иммунологических процессов, связанных с групповой несовместимостью (система гистосовместимости, эритроцитарные системы АВ0, резус и др.), используют следующие реакции:

  1. реакция агглютинации в коллоидной среде для определения неполных антител (например, резус-антител) – проводится как обычная реакция агглютинации, однако солевую среду (электролит) заменяют коллоидной (белок), поскольку неполные антитела полностью теряют свою активность в присутствии электролита;

  2. реакция Кумбса для определения неполных антител – к исследуемой сыворотке, предположительно содержащей неполные (то есть имеющие только один активный центр) антирезусные антитела, добавляют эритроциты; неполные антитела способны связываться с эритроцитами, но не склеивать их (поскольку активный центр только один); при добавлении же антител против иммуноглобулинов человека они склеивают неполные антитела, а значит и эритроциты;

    123

  3. лимфоцитотоксический тест для типирования антигенов ГКГС – к сывороткам против разных антигенов ГКГС добавляют по 2000 исследуемых лимфоцитов, а затем комплемент, который разрушает лимфоциты, несущие антиген, против которого направлена сыворотка; затем добавляют краситель, окрашивающий только живые клетки, и подсчитывают число погибших лимфоцитов.

Zaka-zaka [CPS] RU + CIS

Полезные ссылки:

zaka-zaka

Покупай игры выгодно

РЕКЛАМА, ООО «ГЕЙБСТОР» ИНН: 7842136365

zaochnik

Срочная помощь в написании всех видов работ

РЕКЛАМА, ООО «ЗАОЧНИК.КОМ.» ИНН: 7710949967

skyeng

Лучшие из курсов английского в Skyeng

РЕКЛАМА, ОАНО ДПО «СКАЕНГ» ИНН: 9709022748