Закономерности биосинтеза антител. Методы определения концентрации иммуноглобулинов
НАВИГАЦИЯ ПО СТРАНИЦЕ
Закономерности биосинтеза антител
Индуцированный антигеном биосинтез антител начинается, как правило, с синтеза IgM-антител. Это характерно и для тимуснезависимого, и для тимусзависимого иммунного ответа. IgM-антитела обладают менее выраженным, чем IgG-антитела, защитным действием (несмотря на большую валентность) по следующим основным причинам:
имеют более низкое сродство к антигену;
не обладают цитофильными свойствами (не адсорбируются на фагоцитах);
медленно проникают в экстраваскулярное пространство (большая М масса).
Через определенный промежуток времени достигает максимума синтез IgG-антител, которые являются более эффективными и более «экономичными».
При вторичном иммунном ответе концентрация IgM несколько меньшая, чем при первичном, а концентрация IgG достигает гораздо больших значений и падает медленнее. Также при вторичном ответе резко возрастает синтез специфических IgA.
Методы определения концентрации иммуноглобулинов
Простая радиальная иммунодиффузия в геле по Манчини:
в гель вносят антитела к антителам человека определенного класса (субкласса), дают гелю застыть и вырезают в нем лунки;
в лунки раскапывают исследуемые сыворотки, а также стандартную сыворотку с известной концентрацией искомых иммуноглобулинов в различных разведениях;
при взаимодействии антител, находящихся в сыворотке, и антител к антителам, находящихся в геле, образуется кольцо преципитации (помутнение);
измерив площади колец преципитации в лунках со стандартными сыворотками, строят калибровочную кривую – зависимость между площадью кольца и концентрацией искомого иммуноглобулина;
измерив площади колец преципитации в лунках с исследуемыми сыворотками, их значения откладывают на графике и, опуская перпендикуляр на ось абсцисс, находят концентрацию иммуноглобулина в материале.
Нефелометрия:
в исследуемую сыворотку вносят антитела к антителам человека определенного класса (субкласса), в результате чего в ней образуются иммунные комплексы с достаточно большой молекулярной массой;
через образец пропускают луч лазера, определяя интенсивность рассеянного светового потока (чем больше образовалось комплексов, тем больше рассеяние);
концентрацию иммуноглобулинов также определяют по калибровочной кривой, по оси ординат которой откладывается интенсивность рассеянного света.
Иммуноферментный анализа (ИФА).