Закономерности биосинтеза антител. Методы определения концентрации иммуноглобулинов

Закономерности биосинтеза антител

Индуцированный антигеном биосинтез антител начинается, как правило, с синтеза IgM-антител. Это характерно и для тимуснезависимого, и для тимусзависимого иммунного ответа. IgM-антитела обладают менее выраженным, чем IgG-антитела, защитным действием (несмотря на большую валентность) по следующим основным причинам:

• имеют более низкое сродство к антигену;

• не обладают цитофильными свойствами (не адсорбируются на фагоцитах);

• медленно проникают в экстраваскулярное пространство (большая М масса).

• Через определенный промежуток времени достигает максимума синтез IgG-антител, которые являются более эффективными и более «экономичными».

При вторичном иммунном ответе концентрация IgM несколько меньшая, чем при первичном, а концентрация IgG достигает гораздо больших значений и падает медленнее. Также при вторичном ответе резко возрастает синтез специфических IgA.

Методы определения концентрации иммуноглобулинов

1. Простая радиальная иммунодиффузия в геле по Манчини:

   • в гель вносят антитела к антителам человека определенного класса (субкласса), дают гелю застыть и вырезают в нем лунки;

   • в лунки раскапывают исследуемые сыворотки, а также стандартную сыворотку с известной концентрацией искомых иммуноглобулинов в различных разведениях;

   • при взаимодействии антител, находящихся в сыворотке, и антител к антителам, находящихся в геле, образуется кольцо преципитации (помутнение);

   • измерив площади колец преципитации в лунках со стандартными сыворотками, строят калибровочную кривую – зависимость между площадью кольца и концентрацией искомого иммуноглобулина;

   • измерив площади колец преципитации в лунках с исследуемыми сыворотками, их значения откладывают на графике и, опуская перпендикуляр на ось абсцисс, находят концентрацию иммуноглобулина в материале.

     

2. Нефелометрия:

   • в исследуемую сыворотку вносят антитела к антителам человека определенного класса (субкласса), в результате чего в ней образуются иммунные комплексы с достаточно большой молекулярной массой;

   • через образец пропускают луч лазера, определяя интенсивность рассеянного светового потока (чем больше образовалось комплексов, тем больше рассеяние);

   • концентрацию иммуноглобулинов также определяют по калибровочной кривой, по оси ординат которой откладывается интенсивность рассеянного света.

     

3. Иммуноферментный анализа (ИФА).